خانه > اخبار > اخبار صنعت

چگونه می توان با مشکلاتی که در طی سنتز ژن ایجاد شده است مقابله کرد؟

زمان بروزرسانی: 2020-12-23

منبع:

بازدید: 34

چگونه می توان با مشکلاتی که در طی سنتز ژن ایجاد شده است مقابله کرد؟
سوال: تحت چه شرایطی باید سنتز کامل ژن را انجام دهم؟
پاسخ: از سنتز ژن کامل ممکن است در شرایط زیر استفاده شود
(1) بهبود بیان ژن های خارجی از طریق بهینه سازی کدون.
(2) توالی شناخته شده است ، اما به دست آوردن ژن از نمونه های بیولوژیکی دشوار است.
(3) ژن هایی با شرایط بیان سخت و فراوانی بیان بسیار کم.
(4) ژن های مختلفی که به طور مصنوعی طراحی شده اند.
(5) ریبوزیم های مصنوعی طراحی شده.
(6) مقدار زیادی cDNA برای تراشه DNA.
(7) تغییرات مختلف مصنوعی در ژن ها.


سوال: چه مدت می توان یک ژن کامل را سنتز کرد؟

پاسخ: از نظر تئوری محدودیتی برای طول وجود ندارد. با این حال ، به دلیل عواملی مانند فناوری شبیه سازی ، ظرفیت بردار و غیره ، طول سنتز یک ژن کامل به طور کلی از 10 کیلو بایت بیشتر نمی شود. ما می توانیم کل سنتز ژن را در زیر 10kb کامل کنیم.


سوال: چه نوع حامل رایگان Nupu Biotech می تواند تهیه کند؟

پاسخ: ما اساساً بردارهای تجاری مشترکی داریم ، مانند بردارهای سری PET ، بردارهای pEGFP ، بردارهای بسته بندی لنتی ویروس ، بردارهای siRNA و ...


سوال: آیا بهینه سازی کدون لازم است؟

پاسخ: برای ژنهایی که برای بیان پروتئین استفاده می شوند ، در بیشتر موارد لازم است. به عنوان مثال ، ژن های یوکاریوت باید در پروکاریوت بیان شوند. از آنجا که ترجیح کدون یوکاریوت ها با پروکاریوت ها بسیار متفاوت است ، بهینه سازی کدونی ژن ها به طور قابل توجهی کارایی بیان را بهبود می بخشد. برخی از مشتریان گزارش کردند که توالی بهینه شده 3-5 برابر بیشتر از توالی اصلی است.


سوال: چه مدت طول می کشد تا سنتز کامل ژن انجام شود؟

پاسخ: برای قطعات زیر 500 جفت باز ، متوسط چرخه سنتز 10 روز کاری است. برای قطعات 500-1000 جفت باز ، متوسط چرخه سنتز 12 روز کاری است. به ازای هر 1 کیلوگرم قطعه بیشتر ، میانگین زمان مورد نیاز 7 روز کاری افزایش می یابد.


س :ال: اگر من نیاز به كلكلون كردن در وكتورهای دیگر داشته باشم چه؟

پاسخ: Generalbiosystems —— شرکت خدمات سنتز ژن می تواند به شما کمک کند ژن کامل سنتز شده را به حامل مورد نظر خود به طور رایگان متصل کنید (در هنگام سفارش باید اطلاعات حامل و حامل مربوطه را ارائه دهید). همچنین می توان انواع وکتورهای بیان یوکاریوتی و پروکاریوتی را به صورت رایگان تهیه کرد. شما می توانید برای پرس و جو با کارکنان خدمات مشتری ما تماس بگیرید.


سوال: مراحل سنتز ژن کامل چیست؟

پاسخ: سنتز کامل ژن شامل: طراحی و سنتز آغازگرها ؛ دنباله اتصال PCR ؛ شبیه سازی در برداری تأیید توالی.


سوال: آیا باید سنتز ژن کامل یا شبیه سازی PCR را انتخاب کنم؟

پاسخ: شبیه سازی PCR نیاز به استخراج RNA از بافتها یا سلولهای بیان کننده ژن ، رونویسی معکوس به cDNA و سپس تکثیر ژن هدف از cDNA دارد. ژن هدف بدست آمده تغییر توالی آسان نیست و هر جهش باید از طریق مراحل جهش بعدی به دست آید.

بهینه سازی کدون حتی غیرممکن است. یکی دیگر از محدودیت های اصلی شبیه سازی PCR این است که سخت می توان با موفقیت کلون ژن های خاص مانند ژن هایی با فراوانی کم بیان و ژن هایی را با زمان بیان بسیار کوتاه بیان کرد. در مقایسه ، سنتز کل ژن یک روش شبیه سازی انعطاف پذیرتر ، موفق تر و ارزان تر است.