خانه > اخبار > اخبار صنعت

سرویس بیان سفارشی پروتئین پروکاریوتی

زمان بروزرسانی: 2021-02-24

منبع:

بازدید: 21

سرویس بیان سفارشی پروتئین پروکاریوتی
سیستم بیان پروتئین پروکاریوتی به طور کلی از E. coli به عنوان سلول میزبان استفاده می کند. با توجه به مزایای تکثیر سریع سلول ، بیان زیاد ، تصفیه راحت ، ثبات خوب ، توانایی ضد آلودگی قوی و هزینه کم ، سیستم بیان پروتئین پروکاریوتی بالاترین و قابل اعتمادترین است و همچنین بیشترین استفاده و اقتصادی ترین است سیستم بیان در آزمایش بیان پروتئین - سایپرز ، باشگاه دانش
prokaryotic protein expression system
با این حال ، سیستم بیان پروتئین پروکاریوتی نیز دارای برخی مشکلات است. به عنوان مثال ، اولویت استفاده از کدون در منطقه کد کننده ژن که باید بیان شود یا ناسازگاری عناصر تنظیم کننده بردار با باکتری میزبان منجر به ناتوانی یا بیان کم پروتئین هدف می شود و حتی پروتئین هدف نیز نامحلول است حتی اگر بیان موفقیت آمیز باشد.

با کمک نرم افزار بهینه سازی کدون پیشرو در صنعت و بیش از ده سال تجربه ما در بهینه سازی پروتئین و تصفیه بیان ، Generalbiosystems پشتیبانی فنی حرفه ای را در هر جنبه از بیان پروکاریوتی به شما ارائه می دهد ، نه تنها بیان پروتئین هدف شما را تضمین می کند ، بلکه همچنین می تواند محصولات تحویل با خلوص بالا را با توجه به نیاز شما تضمین کند ، به شما این امکان را می دهد که روی آزمایش های بعدی تمرکز کنید!

محتوای سرویس بیان پروتئین پروکاریوتی سفارشی


ساخت بردار بیان (اختیاری)

از جمله بهینه سازی کدون ، سنتز ژن و زیر طبقه بندی.

پس از بهینه سازی توالی ژن توسط نرم افزار پیشرو صنعت Generalbiosystems ، می توان بیان پروتئین را چندین تا ده برابر افزایش داد.

Generalbiosystems می تواند انواع مختلفی از بردارهای تجاری رایج مانند pET ، pCOLD و غیره را به مشتریان ارائه دهد. علاوه بر این ، Generalbiosystems همچنین از توابع ساخت اجزای بیولوژیکی مصنوعی قدرتمند برای بهینه سازی و تبدیل سری pSYNO بردارهای بیان پروکاریوتیک از جمله sumo ، MBP ، GST Trx و سایر برچسب های بیان پروکاریوتی برای انتخاب شما. برای کسب اطلاعات بیشتر با sales@biolytic.cn تماس بگیرید.


بهینه سازی شرایط بیان

با این فرض که توالی صحیح باشد ، سویه میزبان تأثیر آشکاری بر تأثیر بیان دارد.

Generalbiosystems پلاسمیدهای نوترکیب را به انواع باکتری های میزبان بیان تبدیل می کند ، از جمله BL21 (DE3) ، ArcticExpress (DE3) ، Rosetta (DE3) pLySs ، Rosetta-gami B (DE3) و سایر سویه های متمایز.

پس از تحول ، ما حداقل 6 پلاسمید کلون مثبت را برای آزمایش بیان و بهینه سازی انتخاب کردیم.

در طول آزمایش کوچک ، ما شرایط مناسب برای سویه های مختلف ، از جمله عواملی مانند دما ، محیط ، نوع القا کننده ، زمان القای و مقدار القا را بهینه و آزمایش خواهیم کرد. با استفاده از SDS-PAGE سطح بیان و حلالیت را تشخیص داده و در مورد اینکه آیا مقیاس بندی و مقیاس بندی می شود ، پیشنهادات امکان سنجی ارائه دهید.


تقویت ، بیان و خالص سازی پروتئین

با بهینه سازی ژن شرایط بیان مناسب ، از مقیاس 1 لیتر یا بزرگتر فرهنگ برای القای بیان باکتریهای نوترکیب استفاده کنید. پس از کشت و القا ، یک مرحله تصفیه تمایل یا تبادل یونی ، آبگریز و تصفیه چند مرحله ای ژل را انجام دهید (گزینه های اختیاری یا چند گزینه ای). به طور پیش فرض ، SDS-PAGE خلوص را تشخیص می دهد و وسترن بلات صحت را تشخیص می دهد (اختیاری ، مشتریان آنتی بادی های اولیه تأیید شده را ارائه می دهند).

پردازش پروتئین پس از پردازش (اختیاری)

برای پروتئین های با نیازهای ویژه بیشتر ، Generalbiosystems گزینه های مختلفی را برای شما فراهم می کند ، از جمله حذف برچسب ، عقیم سازی فیلتراسیون ، حذف اندوتوکسین ، یخ زدگی ، تعیین توالی ترمینال N و سایر خدمات پروتئین خالص. برای نیازهای ویژه شما ، مهندسین مجرب ما می توانند خدمات پس از سفارش سفارشی را به شما ارائه دهند.