خانه > اخبار > اخبار شرکت

نحوه دستیابی به ژن هدف

زمان بروزرسانی: 2020-09-02

منبع:

بازدید: 89

نحوه دستیابی به ژن هدف
روشهای اساسی عملیاتی مهندسی ژنتیک عمدتاً شامل چهار مرحله است: کسب ژن هدف ، ساخت وکتور بیان ژن ، معرفی ژن هدف به سلولهای گیرنده ، شناسایی و شناسایی ژن هدف.
در زیر ابتدا به دست آوردن ژن هدف معرفی می شود.


1. هدف آزمایش و هدف آزمایش را تعیین کنید.

به عنوان مثال ، اگر می خواهیم سبزیجات اصلاح شده ژنتیکی تهیه کنیم ، باید سبزی انتخاب کنیم. گوجه فرنگی ، به عنوان سازنده ترین سبزیجات در جهان ، تحقیقات زیادی در این زمینه انجام داده است.

روش اصلاح ژنتیکی نیز بالغ است. همه دوست دارند آن را بخورند. می توان از آن به عنوان سبزی و میوه استفاده کرد. رشد در خانه بسیار راحت است و انتخاب بسیار خوبی است.


2. ژن هدف را پیدا کنید


هنگامی که صفتی را تعیین کردیم که می خواهیم تغییر دهیم ، پس باید ژن کنترل کننده این صفت را پیدا کنیم.
فایلهای توالی ژن مربوطه را در اینترنت جستجو کنید.

3. شبیه سازی ژن


از آنجا که ما باید یک توالی cDNA را از گونه های گوجه فرنگی تقویت کنیم ، این بدان معنی است که ما باید RNA گوجه فرنگی را استخراج کنیم ، برای گسترش cDNA از رونویسی معکوس استفاده کنیم و سپس برای گسترش قطعه ژن دو رشته ای از DNA پلیمراز استفاده کنیم.

سه معرف اصلی در اینجا ترانس کریپتازاز معکوس ، DNA پلیمراز DNA (که معمولاً به عنوان آنزیم PCR شناخته می شود) و معرف تریزول برای استخراج RNA هستند. گسترش آنزیم PCR قطعات 2KB با آنزیم Taq کافی است.


سپس می توان به RNA اشاره کرد! RNA استخراج شده در فریزر قرار می گیرد.

آیا هنوز فایل توالی ژنی که قبلاً بارگیری کردیم را به خاطر دارید؟ اکنون ما باید چند نرم افزار برای باز کردن ، طراحی آغازگرهای تقویت ژن و ساخت بردارها نصب کنیم.


سپس اولین دنباله رشته ای 30 پایه ای و آخرین رشته رشته ای منفی 30 پایه ای را انتخاب کنید و از آنها به عنوان توالی های آغازگر استفاده کنید و سپس یک شرکت بیولوژیکی در اینترنت پیدا کنید که می تواند آغازگرها را ترکیب کند ، مانند Generalbiosystems .

دنباله را برای آنها ارسال کنید ، تا دو روز دیگر آغازگرها برای شما ارسال می شوند. این دو آغازگر احتمالاً کمتر از 7 دلار هستند. سپس دستورالعمل های رونویسی معکوس را دنبال کنید تا رونویسی معکوس با دستگاه PCR انجام شود و سپس از محصول رونویسی معکوس به عنوان الگو استفاده کنید تا ژن با دستگاه PCR طبق دستورالعمل آنزیم PCR تقویت شود.


سپس 10 دلار برای خرید مارکر DNA 5K و پودر آگار برای استفاده از ژل هزینه کنید و سپس یک رنگ (مانند EB) که به ژل اضافه می شود را برای لکه گیری DNA ارسال کنید و یک ژل بزنید تا وجود 2K را تأیید کنید. باند.

در این مرحله ، شبیه سازی ژن کامل است. اگر پول اضافی دارید ، می توانید این محصول PCR را برای شرکتی که به آغازگرها سفارش می دهد ، آزمایش کنید تا توالی را آزمایش کرده و آن را تأیید کنید.